本研究就实验室试剂对测序结果的影响,这些试剂可主要是用于质粒DNA模板的制备、PCR产物纯化、引物合成以及其他的实验操作对测序结果影响。
改进后的热变性方法为将水或者TE缓冲液中的dsDNA于95℃以上的温度下变性5到20min,变性结束后插入碎冰中使其迅速降温到比较低的温度,得到可以用于测序的模板。检测变性后的核酸一般用1%的琼脂糖电泳来检测,得到的ssDNA质量明显提升。
GelRed是一种嵌入型核酸染料,通过静电及电荷相互作用紧密结合到核酸上,能够发出明亮的荧光信号。在琼脂糖凝胶或聚丙烯酰胺凝胶中,GelRed能够高效地对双链DNA(dsDNA)、单链DNA(ssDNA)或RNA进行染色,便于后续的成像和分析。这一特性使得GelRed在分子生物学、遗传学、基因表达分析等领域得到了广泛应用,成为科研人员不可或缺的实验工具。
icogreen荧光染料的工作原理基于DNA与染料之间的相互作用。当Picogreen染料与DNA分子结合时,会显著增强其荧光信号,使DNA变得可视化。